Desarrollo de las condicinones metodológicas para el estuio de receptores de cortisol en tejido / Optimization of the methodological conditions to study of cortisol-receptor complex in hypophyseal tissue by dextrain coated charcoal

En este trabajo se desarrolló la metodología para establecer las condiciones óptimas para el estudio de la unión del complejo receptor-cortisol. Se utilizaron en est estudio 200 hipófisis provenientes de cadáveres. Las condiciones estudiadas fueron: la concentración de proteínas, el pH de los amortiguadores, la temperatura, el tiempo de incubación y la saturación. Los resultados mostraron que la máxima unión específica se logró a una concentración de proteínas de entre 8.5 y 10 mg/ml citosol. La temperatura que se logró la mejor unión fue de 0C. Las incubaciones realizadas mostraron como el tiempo óptimo par la unión, el de 18 hs. El pH óptimo del amortiguador fue entre 7.3 y 7.6, la saturación se logró a una concentración de 3nM de 3H-cortisol, con un exceso de 200 veces ((200x) de cortisol "frío". El método de separación entre el esteroide libre y el unido, utilizando carbón y dextrán, se obtuvo con una eficiencia de 98.7%. La estandarización de estas condiciones es necesaria para el estudio eficiente de las constantes fisico-químicas derivadas de la unión receptor-hormona. Se considera que los resultados del presente trabajo además de contribuir al conocimiento del receptor de cortisol ofrecen un marco de referencia de las condiciones óptimas de tiempo de incubación, temperatura, concentración de proteínas etc., requeridas para su estudio. Esta información facilita el estudio de las constantes de disociación (Kd), asociación (Ka) y número de sitios de unión (n) de una hipófisis aislada en donde se cuenta con poca cantidad de tejido, (1 gramo) lo que no permite establecer todas las condiciones de estudio en cada caso

Cuantificación de receptores de estradiol y progesterona en el cáncer de mama para la elección del tratamiento / Quantification of estradiol and progesterone receptors in breast cancer; for treatment election

Se estudiaron 75 mujeres con cáncer mamario tanto desde el punto de vista clínico, como del contenido de receptores para estadiol y progesterona en el tejido tumoral. Los datos obtenidos se correlacionaron con el tipo histológico del tumor. El 75% de las mujeres de este estudio cursaban la perimenopausia o postmenopausia con edades por arriba de los 44 años, fueron multíparas y habían amamantado a sus hijos por largos periodos. De los 75 tumores para el caso estradiol, 60% fueron receptor R-E2(-) y 40% receptor positivo R-E2(+), mientras que para el receptor de progesterona 44% fueron receptor positivo R-P4(+) y 56% receptor negativo R-P4(-). Según tipo de receptor que se encontró, se formaron 4 grupos: R-E2(-), R-P4(-); R-E2(+), R-P4(+); R-E2(-), R-P4(+) y R-E2(+), R-P4(-). El 37% de los tumores fueron negativos para ambos receptores, mientras que 21% fueron positivos, tanto para el receptor de estradiol como para el de progesterona. El diagnóstico histopatológico difenitivo sólo se obtuvo en 50 casos, los tumores más frecuentes (43 de 50) fueron el carcinoma ductal infiltrante y el adenocarcinoma de conductos sin patrón específico. De los 43 tumores de este tipo, 19 fueron receptor positivo para estradiol y 20 fueron receptor positivo para progesterona en forma independiente, y solamente 13 fueron receptor positivo para ambas hormonas. Con estos datos y con el estado actual de conocimiento en este campo, se comenta la importancia de la presencia, tipo y contenido de receptores en el tumor maligno de mama como criterios para la elección del tratamiento de los pacientes afectados

Caracterización del receptor del estradiol en meningioma humano por el uso de gradientes de sacarosa / Estradiol receptor characterization in human meningioma with the use of sacarose gradients

Se determinó la presencia de receptores para estradiol en 4 tumores con diagnóstico histológico de meningioma. Los 4 tumores fueron intracraniales, dos correspondieron a hombres (casos A y B) y 2 a mujeres (casos C y D). El estudio de receptores se realizó en cada uno de los especímenes quirúrgicos por 2 diferentes métodos. Por el método de carbón dextrán se encontró unión específica para estradiol en los 4 meningiomas estudiados, la unión por este método fue 5.30 fmol/mg de proteína para el caso A. 7.73 fmol/mg de proteína para el caso B. 14.13 fmol/mg de proteína para el caso C y 8.42 fmol/mg de proteína para el caso D. En los casos A y B se logró comprobar la presencia de proteína receptora por el método de gradientes lineales de sacarosa. En estos dos casos se encontró un receptor specífico con un coeficiente d sedimientación de 8 Unidades Svedberg (8S) y una unión de 5 74 fmol/mg de proteína para el caso A y de 3.52 fmol/mg de proteína para el caso B. El coeficiente de sedimentación fue similar al reportado en tejidos normales. Los tejidos tumorales en los cuales se logró demostrar la presencia del receptor por los dos métodos correspondieron a los meningiomas de los dos hombres estudiados. Nuestros resultados confirman la existencia de un receptor para estradiol específico, y demuestran que esta proteína receptora tiene un coeficiente de sedimentación similar al reportado n tejidos "blanco" para esta hormona. No tenemos conocimiento que antes se haya caracterizado el coeficiente de sedimientación del receptor de estradiol en el meningioma. La importancia del hallazgos de receptores para estradiol en este tipo de tumor radica fundamentalmente en la posibilidad de ofrecer a los pacientes afectados dorgas de efecto antiestrogénico como recurso terapéutico o bien como profilaxi de recidiva tumoral